Reakcja cystynowa i reakcja Millona

Reakcja Millona

Do probówki zawierającej 2 ml roztworu białka lub tyrozyny dodawać kroplami odczynnik Millona. Odczynnik Millona otrzymywany jest przez rozpuszczenie 100 gramów rtęci metalicznej w 140 mililitrach stężonego kwasu azotowego HNO3. Reakcji towarzyszy wydzielanie dużej ilości rudo zabarwionego gazu, dlatego odczynnik należy przygotowywać pod wyciągiem. Reakcja Millona jest charakterystyczna dla tyrozyny. Roztwór zabarwia się na czerwono. W przypadku białek zawierających tyrozynę powstają pomarańczowe lub czerwone strąty. Następuje reagowanie jonów rtęciowych ze słabo kwaśną grupą fenolową. Należy pamiętać, że dodatnią reakcję z odczynnikiem Millona dają fenole. Jest to tzw. rtęciowanie pierścienia fenolowego. Odczynnik Millona zawiera azotan rtęciowy, azotan rtęciawy i wolny kwas azotowy.

millona_reakcja_tyrozynarekacja_millona_tyrozyna
Reakcja Millona z roztworem tyrozyny; po prawej stronie kolba z odczynnikiem Millona; H. Rozanski, LBPiE PWSZ Krosno, marzec 2012 r.

millona_reakcja_fenolreakcja_millona_fenol
Reakcja Millona w roztworze fenolu krystalicznego w wodzie. H. Rozanski, LBPiE PWSZ Krosno, marzec 2012 r.

Reakcja cystynowa.

Do probówki zawierającej roztwór białka bogatego w aminokwasy siarkowe (2 ml) lub roztwór cystyny dodać 2 ml 20% roztworu NaOH lub KOH i po wymieszaniu nasycony roztwór octanu ołowiu. Delikatnie ogrzewać przez 1-2 minuty, po czym odstawić. Początkowo biały osad staje się szary, a potem nawet czarnawy. Roztwór ługu rozkłada białko i uwalnia z aminokwasów siarkę, która wydziela się początkowo w postaci siarczku sodu, a następnie w formie siarczku ołowiu (PbS)., który osiada na dnie probówki. W środowisku zasadowym z grupy tiolowej cysteiny lub ugrupowania dwusiarczkowego cystyny uwalnia się siarkowodór. Ten reaguje z octanem ołowiu dając ciemny osad siarczku ołowiu.

reakcja_cystynowa_przedreakcja_cystynowa1
Reakcja cystynowa przed dodaniem octanu ołowiu i po podaniu octanu ołowiu. H. Rozanski, LBPiE PWSZ Krosno, marzec 2012 r.

Posłuchaj wykładu:

 

Leave a Reply

You can use these HTML tags

<a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <s> <strike> <strong>

  

  

  

*

code