Reakcja biuretowa Piotrowskiego, Kocha i ksantoproteinowa.

Reakcja biuretowa Piotrowskiego.

Do probówki wlać roztwór wodny białka (np. albuminy). Proponuję przefiltrować przez sączek, aby roztwór był klarowny. Do 2 ml roztworu białka wlać 2 ml roztworu wodorotlenku sodu NaOH lub wodorotlenku potasu KOH o stężeniu 1 mol/decymetr sześcienny, doprowadzić do wrzenia. Do probówki nanieść delikatnie po ściance 1 ml 0,1% roztworu siarczanu sodu CuSO4. Na granicy zetknięcia obu cieczy tworzy się fioletowy pierścień. Reakcja biuretowa uwarunkowana jest obecnością grup:

image
Reakcję tę dają białka, peptony, polipeptydy. Umożliwia obserwację hydrolizy białka, bowiem białka dają zabarwienie niebieskofioletowe, produkty rozpadu (hydrolizy) od fioletowego do różowego. Aminokwasy nie dają zabarwienia.

reakcja_biuretreakcja_biuretowa_piotrowskiego

reakcja_piotrowskiego_biuretowareakcja_piotrowskiego
Reakcja biuretowa Piotrowskiego; H. Rozanski, LBPiE PWSZ Krosno, marzec 2012 r.

Reakcja ksantoproteinowa.

Do probówki zawierającej 2 ml roztworu białka, np. albuminy dodać 1 ml stężonego kwasu azotowego HNO3 i delikatnie ogrzać. Roztwór białka zabarwia się na żółto. Po dodaniu ługu sodowego lub potasowego barwa uintensywnia się, nawet do pomarańczowej. Jest uwarunkowana obecnością w białku aminokwasów pierścieniowych, np. tryptofanu, tyrozyny, fenyloalaniny, z którymi kwas azotowy tworzy połączenia nitrowe.

ksantoproteinowa_reakcja_1067x800reakcja_ksantoproteinowa_1067x800
Reakcja ksantoproteinowa; H. Rozanski, LBPiE PWSZ Krosno, marzec 2012 r.

Reakcja Kocha.

Do probówki zawierającej 2 ml roztworu białka (przefiltrować, aby był klarowny) dodawać kroplami 20% roztwór wodny kwasu sulfosalicylowego. W pewnym momencie powstaje zmętnienie, a nawet osad. Jest to reakcja bardzo czuła, bowiem kwas sulfosalicylowy strąca białko w rozcieńczeniu 1:50 000. Metoda ta znalazła zastosowanie do wykrywania białka w moczu.

DSC00234_1067x800
Roztwór białka przefiltrowany przed dodaniem kwasu sulfosalicylowego.

DSC00236_1067x800DSC00237_1067x800
Roztwór białka po dodaniu roztworu kwasu sulfosalicylowego; H. Rozanski, LBPiE PWSZ Krosno, marzec 2012 r.

Posłuchaj wykładu:

 

Leave a Reply

You can use these HTML tags

<a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <s> <strike> <strong>

  

  

  

*

code